¿Qué es una prueba de endotoxinas?, ¿Por qué la prueba de endotoxinas es tan importante para la industria farmacéutica?. Estos y otros interrogantes son respondidos y analizados a continuación.
La endotoxina es un tipo de pirógeno que causa fiebre. Es un componente de la pared celular de bacterias Gram-negativas (GNB), como E. coli. Cuando la endotoxina ingresa en el torrente sanguíneo, induce inflamación, una reacción febril (pirógena) e incluso puede provocar la muerte.
¿Por qué la prueba de endotoxinas es tan importante para la industria farmacéutica?
Dado el riesgo que representa la presencia de endotoxinas, la verificación de su existencia en productos farmacéuticos inyectables y dispositivos médicos es una prueba crucial de control de calidad para garantizar su seguridad para el uso humano.
¿Qué hace único al Factor C recombinante (rFC) y cuáles son los beneficios que ofrece en comparación con otras pruebas?
La endotoxina activa el Factor C, lo que desencadena una cascada de reacciones de coagulación sanguínea que es la base de la prueba LAL. El rFC se produce a partir de un clon del gen que produce el LAL. Su producción mediante ingeniería genética proporciona un producto estable, invariable, altamente sensible y específico para endotoxinas, con una alta capacidad de rendimiento para garantizar la calidad del proceso de fabricación de medicamentos, desde las pruebas de agua y materias primas hasta el producto farmacéutico final. La introducción del rFC ha transformado la forma en que se realizan las pruebas de endotoxinas, haciéndolas más simples, precisas y robustas.
¿Cuáles son los métodos para las pruebas de endotoxinas y sus limitaciones?
La prueba de pirógenos en conejos in vivo (RPT) es la más antigua para la detección de pirógenos. Sus resultados son solo cualitativos, tiene sensibilidad variable y es propensa a resultados inconclusos.
La otra alternativa es la prueba de Limulus amoebocyte lysate (LAL), que utiliza sangre recolectada de cangrejos herradura. Aunque la prueba LAL es cuantitativa, presenta variaciones entre lotes en sensibilidad y especificidad para endotoxinas, además de carecer de una metodología estandarizada para el procesamiento de los ensayos. Además, la presencia de β-glucanos en las muestras puede interferir en los resultados, aumentando el potencial de falsos positivos.
Ambos métodos dependen del uso de animales: conejos o cangrejos herradura.
¿Por qué la prueba con rFC es superior a la prueba LAL?
Mientras que la prueba LAL involucra una cascada de coagulación con múltiples enzimas para detectar la presencia de endotoxinas, el rFC por sí solo es suficiente para realizar esta detección. Esto hace que la prueba sea más eficiente, robusta y menos susceptible a interferentes como los β-glucanos. Además, la prueba rFC es muy fácil de adoptar, ya que el flujo de trabajo para las pruebas basadas en rFC es muy similar al de las pruebas basadas en LAL.
¿Cuál es el panorama mundial en términos de regulación sobre el rFC?
Las principales farmacopeas están avanzando hacia su aceptación:
En 2015, la Farmacopea Europea aceptó y aprobó el rFC con el capítulo Ph. 2.6.32, permitiendo el uso de este método en los países europeos. La Comisión de la Farmacopea Europea también ha permitido la inclusión de esta prueba en varias monografías.
En enero de 2024, la Farmacopea Británica publicó su capítulo.
En noviembre de 2024, la United States Pharmacopeia (USP) publicó el nuevo capítulo <86>, que respalda el uso de reactivos no derivados de animales para pruebas de endotoxinas, incluyendo el rFC y los reactivos en cascada recombinantes (rCR). Este capítulo proporciona a los fabricantes la información necesaria para usar reactivos no derivados de animales en pruebas de endotoxinas.
Esto demuestra que la regulación finalmente se está alineando con las recomendaciones de reducción del uso de animales, como establece el principio de los 3R: Reducir, Reutilizar y Reciclar.
¿Por qué necesitamos avanzar en esta dirección?
Es ampliamente conocido que la actual dependencia excesiva del LAL para pruebas de endotoxinas impacta, en primer lugar, en las poblaciones de cangrejos herradura, que han enfrentado constantes disminuciones en sus ya limitadas áreas de existencia. En la región de Asia-Pacífico, los cangrejos herradura ahora son considerados especies amenazadas, y el impacto de las actividades humanas en su hábitat ha llevado a la desaparición de algunas especies en ciertas áreas.
Además, este impacto no se limita a los cangrejos herradura, sino que afecta al ecosistema en general, ya que existen especies que dependen de ellos como fuente de alimento.
¿Cuál es el impacto de esto en la salud pública?
Dado que la producción global de medicamentos inyectables y dispositivos médicos depende de esta cadena de suministro, la sostenibilidad de la producción farmacéutica está en riesgo. Este problema fue ampliamente discutido durante la pandemia de COVID-19, que exigió la producción de miles de millones de dosis de vacunas, además del consumo elevado de otros medicamentos inyectables utilizados en el tratamiento y soporte de personas infectadas.
Enfocada en la salud pública mundial, bioMérieux, una vez más se destaca al ofrecer la línea ENDONEXT, pruebas de endotoxinas basadas en rFC.
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